吴斯语
胡可饰
李言闻好友之女，李时珍的夫人。被父亲托孤，寄住李家。温柔美丽，聪慧冷静。一生都与他同甘共苦，是个贤良的好内助。
嘉靖皇帝
温兆伦饰
性格固执、多疑、暴戾，却有他独特的一套治国和御臣的手段。
徐长明
郭伟华饰
许绅之后的太医院院使，为人圆滑，有城府。
朱苌葶
崔波饰
荆王府郡主，美丽过人，才华横溢，自小体弱多病，娇生惯养，性格泼辣，有主见。后出家成为道姑，执迷于炼长生不老灵丹。
李时珍
黄海冰饰
从小聪慧过人，刚直纯真，胸怀坦荡，心地善良，不过不谙处世之道，凡事不计后果。受父亲的影响沉迷于医学。弃文从医后行医济世，救人无数。后历经千辛万苦，以其执着的信念和超凡的毅力给后世留下了不朽的巨著「本草纲目」。
李行义
万思维饰
出身世家，李言闻义子，因嫉妒李时珍的才情，一直对他有心结。暗恋斯语。后拜名道陶仲文为师，入宫做了道士。有强烈的权势欲，为了名利不惜用医术去害人。帮杨雪英毒害嘉靖不成，逃出宫去，后上山为匪，又参加农民起义军，兵败被俘，不愿遭受凌迟极刑，向李时珍求得毒药，自杀而亡。
李言闻
郭凯敏饰
李时珍的父亲。秉承家族衣钵，世代行医。正直宽厚，品行高洁，崇尚儒家学派。
蒋太后
沈丹萍饰
嘉靖皇帝的母亲，精明厉害，喜欢玩弄权术。
